「佐伯又三郎」とは、生年は不明であるが「新撰組の副長助勤」を担当されていたと言われている。出身は「江戸」・「長州藩」とされている。彼には謎が多くここで述べることも確信をつくものではない。多数の説を踏まえてご紹介していくと、「密偵説」といった考えが存在しており「長州藩」か「幕府」から送り込まれたと言われる「スパイ」であったと考えられている。辻褄が合うのが、同時期に新撰組はいった「斎藤」と二手に分かれて行動していたことから、作戦密偵をしていたとも考えられる。そして、「佐伯又三郎の死」であるが誰に殺されたのか、死因がわかっておらず「密偵行為がバレたため芹沢に殺害された」、「本当のスパイは新見でそれを捜査していた佐伯又三郎が誘惑されて暗殺された」、「スパイ行為にミスがあったか、二重スパイがばれて長州藩に殺された」といった多彩な説が飛び交っているのが現代の現状である。フィクションとしては、大河ドラマで上記にはないオリジナル説で殺されている。